Ikääntymistä estävät interventiot vaikuttavat eliniän vaihteluun sukupuolen, rasituksen, ruokavalion ja huumeista riippuvaisessa muodissa

Ota yhteyttä:jerry.he@wecistanche.com

Andrzej Bartke1, Tracy R. Evans2 ja CJM Musters3

1 Department of Internal Medicine, Geriatrics Research, Southern Illinois University School of Medicine, Springfield, IL 62794, USA

2Illinois State Museum Research and Collections Center, Springfield, Illinois 62703, USA

3 Institute of Environmental Sciences, Leiden University, Leiden 2333 CC, Alankomaat

Correspondence to: Andrzej Bartke; email: abartke@siumed.edu

Avainsanat: pitkäikäisyys, varianssi, kasvuhormoni, rapamysiini, akarboosi, 17-alfaestradioli, kalorirajoitus, hiiret

Vastaanotettu: 5. helmikuuta 2019 Hyväksytty: 12. kesäkuuta 2019 Julkaistu: 24. kesäkuuta 2019

Tekijänoikeus: Bartke et al. Tämä on avoimen pääsyn artikkeli, jota jaetaan Creative Commons Attribution License -lisenssin (CC BY 3.0) ehtojen mukaisesti. Tämä lisenssi sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja jäljentämisen missä tahansa välineessä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde mainitaan. .

Cistanchella on ikääntymistä estävä vaikutus

ABSTRAKTI

Äskettäin raportoitiin, että ihmisten elinajanodoteeroihin liittyvät sosioekonomiset tekijät liittyvät eroihin kuoleman iän vaihteluissa. Sen määrittämiseksi, onkoikääntymistä vastaaninterventiot muuttavat myös pitkäikäisyyden varianssia, olemme analysoineet tietoja hiiristä, joita on hoidettu ikääntymiseen vaikuttavilla lääkkeillä tai kalorirajoituksilla, sekä pitkäikäisiltä mutanttihiiriltä. Pitkän iän muutosten ja eliniän varianssin suhteen havaittiin riippuvan sukupuolesta ja hoidosta ja ilmeisesti myös rasituksesta. Pidentynyt uroshiirten pitkäikäisyys, kun niitä on käsitelty tehokkaallaikääntymistä vastaanhuumeisiin liittyi kuoleman iän vaihtelun väheneminen ja varhaiskasvatuksen ilmeinen väheneminen. Kasvuhormoneihin liittyvien mutaatioiden ja kalorirajoitusten aiheuttama eliniän pidentyminen lisäsi pitkäikäisyyden vaihtelua vain naisilla. Päättelemme, että vaikutusikääntymistä vastaaninterventiot kuoleman iän vaihteluun ja yksilöllisten eliniän jakautumiseen laboratoriohiirillä on hoidosta riippuvaisia ​​ja seksuaalisesti dimorfisia.

JOHDANTO

Ikääntymistutkimuksissa eliniän pituuden muutoksia analysoidaan yleensä vertaamalla keskimääräistä (keskiarvoa) tai mediaanipituutta. Usein otetaan huomioon myös jokin arvio maksimaalisesta pitkäikäisyydestä. Vaikka keskihajonnan arvot tai keskiarvon standardivirheet raportoidaan rutiininomaisesti, yksittäisen iän jakautumista kuollessa analysoidaan tai keskustellaan harvoin. Tämä on ristiriidassa viimeaikaisen kiinnostuksen kanssa analysoida ikääntymisen biomarkkerien jakautumista käyttämällä tilastollista etäisyysmittausta [1], jotta voidaan arvioida fysiologisen säätelyhäiriön taso ja suhteuttaa se sietokykyyn ja kestävyyteen ikääntymisen aikana [2].

Van Raalte ja hänen kollegansa raportoivat tuoreessa demografisten tietojen analyysiin perustuvassa julkaisussa, että sosioekonominen asema ei vaikuta pelkästään keskimääräiseen elinikään vaan myös ihmisen eliniän vaihteluun [3]. Suomalaisnaisten esimerkillä nämä tutkijat osoittivat, että vähemmän koulutettujen ja varakkaiden ihmisten keskimääräisen eliniän lyheneminen liittyy suurempaan eliniän vaihteluun. Elinajanodotteen ja eliniän vaihtelun käänteinen suhde nähtiin myös muissa ihmispopulaatioissa [3]. Näiden havaintojen käytännön seuraus on, että sekä yksilöiden että terveydenhuoltojärjestelmien kannalta on vaikeampi ennustaa etuoikeutettujen ihmisten kuolinikää kuin etuoikeutetuilla kerroksilla tai koko väestöllä.

Koska tällä suhteella on mahdollinen merkitys kuolleisuustietojen ja fysiologisten biomarkkerien analysoinnissa ikääntymistutkimuksissa sekä erilaisille kansanterveydellisille näkökohdille, ajattelimme, että se

Taulukko 1. Sovitetun pitkäikäisyyden regressiokertoimien arviot varianssia, vinoutta ja kurtoosia vastaan.

Jokaisessa testiryhmässä pitkäikäisyys mitataan mediaani-iänä kuollessa, varianssia iän keskimääräisenä absoluuttisena poikkeamana (MAD) kuollessa, vinoutta iän vinoutumisena kuollessa ja kurtoosia iän kurtoosina kuollessa. Arviot, keskivirhe (SE) ja t-arvo ovat lineaarisista sekamalleista, joissa tutkimuspaikka on satunnaisvaikutusmuuttuja. ² ja p-arvo ovat todennäköisyyssuhdetestistä (LRT), jossa mallia riippumattoman muuttujan kanssa verrataan malliin ilman kyseistä muuttujaa.

on kiinnostavaa määrittää, onko interventioilla, joiden tiedetään pidentävän koe-eläinten keskimääräistä (tai keskimääräistä ja maksimaalista) pitkäikäisyyttä, vaikutusta eliniän vaihteluun. Oletimme, että eliniän pidentäminen geneettisin, ruokavalion tai farmakologisin keinoin johtaa eliniän vaihtelun vähenemiseen. Kansallisen ikääntymisinterventioiden testausohjelman (ITP) [4] ja hiiren pitkäikäisten geenien vuorovaikutuksia kalorirajoituksen (CR) [5-7] vuorovaikutuksista saatujen tietojen tarkastus kuitenkin osoitti, että pitkäikäisyyden vastavuoroiset muutokset ja sen vaihtelua ei havaita johdonmukaisesti. Tämä viittasi siihen, että hypoteesimme olisi mitä todennäköisimmin hylättävä ja nostettu esiin uusi kysymys, eli mitkä tekijät vaikuttavat eliniän vaihteluun. Tässä raportoimme tulokset tutkimuksesta, jonka tarkoituksena on analysoida sukupuolen, rasituksen, elämää pidentävien interventioiden vaikutuksia ja niiden vuorovaikutusta eliniän vaihteluun.

TULOKSET

Kun hiirten pitkäikäisyys ITP-tietojoukossa korreloi pitkäikäisyyden varianssiin, havaittiin varianssin voimakas väheneminen pitkäikäisyyden myötä. Myös vinous väheni, kun taas kurtosis eli epätasaisuus lisääntyi (taulukko 1). Kuitenkin, kun sukupuoli sisällytettiin näihin suhteisiin, havaitsimme sen vaikuttavan voimakkaasti tuloksiin (kuva 1; taulukko 2).

Silmiinpistävin havainto oli, että pitkäikäisyyden varianssi on vahvasti seksuaalisesti dimorfinen (Kuva 1) (Taulukko 2: ²=20.47; df=1; p < 0.{16)="" }}01).="" naisilla="" varianssi="" ei="" vähentynyt="" iän="" pidentyessä="" (taulukko="" 2:="" ²="0.95;" df="1;" p="0.329)," kun="" taas="" miehillä="" väheni="" (²="" {{="" 13}},47;="" df="1;" p="">< 0,001).="" vinous="" väheni="" (²="33,74;" df="1;" p="">< 0,001),="" yhtä="" paljon="" sekä="" naisilla="" että="" miehillä="" (²="0.35;" df="1;" p="" {="" {26}}.556).="" kurtoosi="" nousi="" hieman="" (²="4.51;" df="1;" p="0.034)," mutta="">

Kuva 1. Pitkäikäisyyden ja varianssin (a), vinouden (b) ja kurtoosin (c) välinen suhde. Naaraat: punaiset ympyrät; urokset: siniset ympyrät; täytetyt ympyrät: käsitelty; ja täyttämättömät ympyrät; hoitamaton.

Taulukko 2. Arvioita pitkäikäisyysmallien kontrasteista varianssia, vinoutta ja kurtoosia vastaan, mukaan lukien sukupuoli sekä sukupuolen ja riippumattomien muuttujien välinen vuorovaikutus.

Arviot, keskivirhe ja t-arvo ovat lineaarisista sekamalleista, joissa tutkimuspaikka on satunnaisvaikutusmuuttuja. ² ja p-arvo ovat todennäköisyyssuhdetestistä (LRT), jossa mallia riippumattoman muuttujan kanssa verrataan malliin ilman kyseistä muuttujaa.

merkittävästi pienempi miehillä kuin naisilla (² {{0}},16; df=1; p < 0,001).

Graafinen esitys pitkäikäisyyden vaihtelusta kontrollihiirillä vs. tehoaineella käsitellyt hiiretikääntymistä vastaanyhdisteet osoittivat, että lukuun ottamatta yhdisteiden vaikutusta mediaanipituuteen, ne näyttivät pääasiassa vähentävän varhaista kuolemaa miehillä (kuvio 2).

Pitkäikäisten geenien/CR-tutkimusten tietojoukot eivät osoittaneet yleistä korrelaatiota keskimääräisen eliniän testiryhmäkohtaisen ja pitkäikäisyyden varianssin välillä, mitattuna MAD:na testiryhmää kohti (²=0.25; df=1; p=0.617). Kun sukupuoli otettiin huomioon ja tutkimukset jaettiin ruokavalion, genotyypin tai ruokavalion ja genotyypin vaikutuksen mukaan, havaittiin, että kun hiirillä oli pitkäikäisiä genotyyppejä ja niitä hoidettiin

Kuvio 2. Tiheyskäyrät kontrollihiirten (a) ja tehoaineella käsiteltyjen hiirten iästä kuollessaikääntymistä vastaanlääkkeet (b). Cox-testi erojen selvittämiseksi naaraiden (yhtenäinen punainen viiva) ja urosten (sininen katkoviiva) eloonjäämisessä käyttämällä tutkimuspaikkaa satunnaisvaikutusmuuttujana: kontrollihiiret: z=11.02, p < {{="" 7}},001;="" hoidetut="" hiiret:="" z="6,95," p=""><>

Taulukko 3. Arvioita pitkäikäisyyden mallien kontrasteista varianssilla, mukaan lukien sukupuoli sekä sukupuolen ja riippumattomien muuttujien välinen vuorovaikutus; CR, elämää pidentävät mutaatiot tai molemmat.

Arvio, standardivirhe ja t-arvo ovat lineaarisista sekamalleista, joissa jännitys on satunnaisvaikutusmuuttuja. ² ja p-arvo ovat todennäköisyyssuhdetestistä (LRT), jossa mallia riippumattoman muuttujan kanssa verrataan malliin ilman kyseistä muuttujaa.

CR, naisten varianssi kasvoi lähellä tilastollista merkitsevyyttä (²=3.25; df=1; p=0.071), kun taas miehillä näin ei näyttänyt olevan (Kuva 3; Taulukko 3 ).

Graafinen esitys vertailuhiirten ja pitkäikäisten mutanttihiirten pitkäikäisyyden vaihtelusta CR:llä hoidetuissa hiirissä osoitti, että paitsi hoidon elinikää pidentävä vaikutus mediaanipituuteen, sukupuolten välinen ero pitkäikäisyydessä johtui pääasiassa joidenkin urosten kuolemasta. suhteellisen aikaisin (kuva 4).

KESKUSTELU

Tämän tutkimuksen tulokset osoittavat, että interventiot, jotka pidentävät laboratoriohiirten pitkäikäisyyttä, voivat myös muuttaa iän jakautumista ja varianssia kuollessa. Näiden muutosten esiintyminen, suuruus ja ilmeisesti myös suunta riippuvat eläinten sukupuolesta ja toimenpiteiden luonteesta. ITP-tutkimusten suuressa tietojoukossa pitempi iän lisääntyminen liittyi miesten varianssin vähenemiseen (s<0.001) but="" not="" in="" females.="" moreover,="" the="" distribution="" of="" the="" data="" suggested="" a="" possible="" trend="" for="" variance="" in="" female="" data="" changing="" in="" the="" opposite="" direction="" (fig="" 1).="" in="" long-lived="" mice="" with="" gh-related="" mutations,="" subjected="" to="" cr,="" the="" variance="" was="" not="" related="" to="" longevity="" in="" males="" but="" seemed="" to="" increase="" with="" longevity="" in="" females="" (p="">

Seksuaalinen dimorfismi vasteissa pitkäikäisyyttä pidentäviin interventioihin ei ole odottamaton, ja löydöksemme osoittavat, että yksilöllisen kuolinajan jakauman suhde väestön keskimääräiseen elinikään on myös sukupuolesta riippuvainen. Näin ollen nykyiset tulokset lisäävät kasvavaa määrää todisteita siitä, että ikääntymisen eri näkökohdat, mukaan lukien pitkäikäisyys, sekä vastaukset erilaisiinikääntymistä vastaaninterventioita ei voida ennustaa eri sukupuolta olevilta henkilöiltä saatujen tietojen perusteella [8].

Ihmisen pitkäikäisyyden ja sen vaihtelevuuden vastavuoroinen suhde, jonka Van Raalte et al. [3] eri tietosarjoista löytyi saman väestön segmenteistä, jotka on erotettu tulojen, koulutustason ja/tai työsuhteen tyypin perusteella. Sosioekonomisten tekijöiden hyvin dokumentoidun vaikutuksen ihmisen ikääntymiseen biologisen perustan uskotaan sisältävän erot ruokavaliossa, terveyteen liittyvissä käytöksissä sekä terveydenhuollon saatavuudessa ja laadussa, vaikka jälkimmäisten tekijöiden merkitys on Suomi ja muut maat, joissa on erinomainen terveydenhuoltojärjestelmä, on oletettavasti pieni tai puuttuu.

Koska kunkin neljän tutkitun kohortin eläimet olivat geneettisesti heterogeenisiä ja kolme neljästä kohortista suhteellisen pieniä, tämä tutkimus ei salli mitään varmaa johtopäätöstä mahdollisista eroista kantojen välillä. Tämän ongelman ratkaisemiseksi tarvitaan tutkimuksia, jotka sisältävät suuria geneettisesti erillisiä populaatioita, erilaisia ​​sisäsiitoskantoja ja mieluiten myös niiden risteyksiä.

Kuva 3. CR:n, elämää pidentävien mutaatioiden tai molempien vaikutukset suhteeseen pitkäikäisyyteen ja varianssiin naaras- ja uroshiirillä. Naaraat: punaiset ympyrät; urokset: siniset ympyrät; täytetyt ympyrät: käsitelty; ja täyttämättömät ympyrät; hoitamaton.

Analyysimme perusteella voidaan päätellä, että tutkimuksissaikääntymistä vastaanKoe-eläinten interventioiden muutoksia eliniän vaihtelussa ei voida ennustaa eliniän muutoksista. On mielenkiintoista spekuloida, että tämä voi liittyä eroihin mekanismeissa, jotka ovat vastuussa erilaisten interventioiden eliniän pidentämisestä.

Analysoimissamme tietosarjoissa oli esimerkkejä eroista varhaisten kuolemien osuudessa naisilla ja miehillä sekä pitkäikäisten (mutantti, kalorirajoitettu tai lääkehoidettu) verrattuna kontrolliin (villityyppi, ruokittu ad libitum, tai käsittelemättömät) eläimet ja eloonjäämiskäyrien kaltevuus vaihteli myös joissain tapauksissa. Vino ja kurtoosi olivat odotetusti. Erot yksittäisten eliniän jakautumisessa ovat saattaneet vaikuttaa havaittuihin vaihtelueroihin. Esimerkiksi varhaisten kuolemantapausten vähentyminen todennäköisesti vaikutti lääkehoitoa saaneiden miesten pitkäikäisyyteen ITP-tutkimuksissa [9]. Tämä ja muut esimerkit varhaisten kuolemien roolista koko kohortin pitkäikäisyyden määrittämisessä muistuttavat demografisia havaintoja sosioekonomisten tekijöiden vaikutuksista ihmispopulaatioihin [3].

Yksittäisten kuolleisuusarvojen ikäjakauman analyysi viittaa tutkittavien erilaiseen vaikutukseenikääntymistä vastaaninterventioita elämänhistorian eri osissa. Tämä puolestaan ​​​​on todennäköisesti yhteydessä heidän toimintansa erilaisiin mekanismeihin. Merkittävä korrelaatio pidentyneen eliniän ja yksittäisten kuolemien vaihtelun vähenemisen kanssa eri ihmispopulaatioissa [3] ja ITP-kohortissa olevilla uroshiirillä (kuva 1) saattoi johtua osittain "kattovaikutuksesta", kun pitkäikäisyys lähestyy lajin enimmäiselinajan arvo. Todennäköisemmin se heijastaa suurempaa osaa varhaisista kuolemista

Kuvio 4. Tiheyskäyrät kontrollihiirten (a) ja hiirillä, jotka on käsitelty anikääntymistä vastaanruokavaliota sekä ikääntymistä estäviä genotyyppejä (b). Cox-testi naaraiden (tasainen punainen) ja urosten (katkoviiva sininen) eloonjäämiserojen selvittämiseksi kannan ollessa satunnaisvaikutusmuuttuja: kontrollihiiret: z=0.57, p=0.57; hoidetut hiiret: z=3.97, p <>

Taulukko 4. Keskimääräinen eliniän kasvu prosentteina interventioiden testausohjelmassa annetuista farmakologisista aineista.

Alaviite: Joillekin yllä luetelluille lääkkeille suoritettiin lisätutkimuksia käyttämällä erilaisia ​​annoksia ja/tai hoitoa aloitettiin eri iässä, mikä johti jonkin verran erilaiseen prosentuaaliseen keskimääräiseen eliniän pidentymiseen.

eri etiologiat ryhmissä, joilla on lyhyempi keskimääräinen elinikä. Mielenkiintoista on, että useiden ikääntymiseen mekaanisesti liittyvien fysiologisten prosessien liikeradat ovat vaihtelevampia lyhytikäisillä kuin poikkeuksellisen pitkäikäisillä [10].

Riippumatta asiaan liittyvistä mekanismeista, tietomme viittaavat siihen, että eliniän vaihteluiden muutosten analysointi vastauksena erilaisiin interventioihin voi tarjota lisätietoa havaittujen vaikutusten luonteesta.

MATERIAALIT JA MENETELMÄT

Käytimme tietoja yksittäisten hiirten eliniän pituudesta (ikä kuollessa päivinä mitattuna) ITP:stä [4] ja Southern Illinois Universityssä (SIU) tehdyistä tutkimuksista [5-7]. ITP:ssä geneettisesti heterogeenisiä (UM-HET3) naaras- ja uroshiiriä, jotka olivat peräisin neljän sisäsiittoisen kannan risteyttämisestä, käsiteltiin erilaisilla yhdisteillä alkaen varhaisesta aikuisiästä ja jatkuen, kunnes ne kuolivat tai lopetettiin, kun niiden katsottiin olevan kuolevia. Nämä tutkimukset tehtiin samanaikaisesti kolmessa yhteistyössä toimineessa laitoksessa. Vertaisarvioidussa kirjallisuudessa on raportoitu sekä pitkäikäisyyden merkittävä pidentyminen että vaikutusten puuttuminen [9, 11- 15]. Taulukossa 4 on luettelo yhdisteistä, niiden vaikutuksista ja prosentuaalisesta kasvusta käsiteltyjen eläinten keskipitkässä iässä sekä viittaukset julkaisuihin, jotka raportoivat pitkäikäisyystietoja.

Farmakologiset vaikutuksetikääntymistä vastaaninterventiot ITP-tutkimuksissa analysoitiin käyttämällä käsiteltyjen hiirten tietoja, joilla oli dokumentoitu eliniän pidentäminen ja vastaavat kontrollit. Näihin ryhmiin kuuluvat akarboosilla [9], aspiriinilla [11], 17- -estradiolilla [9], ravinnon glysiinillä [15], nordihydroguaiaretiinihapolla [9, 11], ProtandimTM (kasviuutteiden seos) [14] hoidetut eläimet [14] tai rapamysiini [16]. Pitkäikäisyyden varianssia tutkittiin suhteessa hoitoon ja sukupuoleen ottaen huomioon erot testauslaboratorioissa [4].

Toinen tietojoukko luotiin yksittäisten hiirten pitkäikäisyystiedoista kolmesta erillisestä kokeesta, joka koski kalorirajoituksen (CR) vuorovaikutusta yhden kolmesta elämää pidentävästä mutaatiosta [5-7]. Näissä kokeissa käytettiin hiiriä, jotka estävät kasvuhormonin (GH) signalointia mutaatiolla, joka häiritsi kolmen tyyppisten aivolisäkkeen etuosan solujen erilaistumista, mikä johti hypopituitarismiin mukaan lukien GH-puutos [17, 18], GH:n (GHRH) geenin deleetio, mikä johti eristettyyn geeniin. GH-puutos [19] tai GH-reseptorigeenin (GHR) deleetio, joka johtaa GH-resistenssiin [20]. Noin puolet kussakin genotyyppi/sukupuoliryhmässä olevista eläimistä ruokittiin ad libitum (AL), kun taas loput alistettiin kalorirajoitukselle (CR) alkaen varhaisesta aikuisiästä ruokkimalla niitä 60 -70 prosenttia aikana kulutetusta ruuasta. edellisellä viikolla iän, sukupuolen ja genotyypin mukaan vastaavat AL-hiiriä. Käytetyt mutaatiot ylläpidettiin heterogeenisellä geneettisellä taustalla, joka oli erilainen jokaiselle mutaatiolle ja erilainen kuin ITP-hiirten geneettinen koostumus. Jokainen näissä tutkimuksissa käytetyistä kolmesta mutaatiosta pidentää sekä naisten että miesten pitkäikäisyyttä, kun taas CR:n vaikutukset pitkäikäisyyteen olivat mutaatiosta ja sukupuolesta riippuvaisia ​​[5-7]. Taulukossa 5 on lueteltu keskipitkän iän prosenttiosuus kussakin genotyyppi/sukupuoli/ruokavalioryhmässä.

Pitkäikäisyyden varianssia tutkittiin suhteessa eri ryhmiin (genotyyppi, ruokavalio ja sukupuoliyhdistelmät). Interventiot, jotka olivat tehottomia (kuten CR GHR:ssä

Taulukko 5. Kalorirajoituksen ja kasvuhormonisignaloinnin geneettisen tukahdutuksen interaktiiviset vaikutukset keskimääräiseen pitkäikäisyyteen kussakin genotyyppi/sukupuoli/ruokavalioryhmässä.

Ryhmää on 24: kolme kantaa (Ames, GHR, GHRH); kaksi sukupuolta; kaksi ruokavaliota (CR ja AL); ja kaksi genotyyppiä (normaali ja kääpiö tai knock-out). Normaali (N) tarkoittaa mutanttihiirten normaaleja sisaruksia.

-/- hiiret) otettiin huomioon sen mahdollisuuden huomioon ottamiseksi, että CR voisi muuttaa varianssia muuttamatta mediaania.

Teimme kaikki tilastolliset analyysit R-ohjelmistolla 3.4.4 [21]. Pitkän iän ja pitkäikäisyyden varianssin välisen suhteen tutkimiseksi laskemme kaikkien saatavilla olevien testiryhmien naisten ja miesten mediaani-iän kuollessa. Valitsimme mediaanin keskiarvon sijaan, koska emme voineet olettaa, että pitkäikäisyyden varianssi jakautui normaalisti. Pitkäikäisyyden varianssille laskemme MAD:n eli mediaaniabsoluuttisen poikkeaman, joka on vahva metrisovitus ei-normaalijakaumille [22]. Mediaani, MAD, vino ja kurtoosi laskettiin kaikki kuvatulla () funktiolla pakettipsych [23]. Pitkän iän ja varianssin, vinouden ja kurtoosin välisten suhteiden testaamiseen käytettiin lineaaristen sekavaikutteisten mallien paketin lme4 [24] funktiota lmer() yhdistettynä todennäköisyyssuhdetestin (LRT) drop1()-funktioon. Naaraiden ja urosten eloonjäämiserojen testaamiseen käytettiin Cox-testiä sekavaikutuksille, eli paketin foxme funktiota foxme() [25]. Satunnaisvaikutusmuuttujana tutkimuspaikka sisällytettiin kaikkiin ITP-tietojen analyyseihin ja kanta kaikkiin SIU (mutations/CR) -tietojen analyyseihin. Kaaviot muodostettiin käyttämällä pakettiauton scatterplot()- ja density plots()-funktioita [26]. Pidimme tiheyskäyristä enemmän kuin Kaplan-Meierin selviytymiskaavioita, koska ne osoittavat selkeämmin, missä erot naaraiden ja urosten välillä esiintyivät.

KIITOKSET

Olemme kiitollisia tohtori Richard Millerille hyödyllisimmistä kommenteista ja ehdotuksista ja tohtori Scott Pletcherille hänen kommenteistaan, jotka koskevat löydöstemme tulkintaa. Tätä työtä tuki NIA ITP-ohjelman ja apurahojen AG031736, AG019899 ja AG038850 kautta sekä American Diabetes Association, apuraha 1- 19-IBS-

126.

ETURISTIRIITOJA

Kirjoittajat eivät ilmoittaneet kilpailevia taloudellisia etuja.